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蛋白多因子檢測
蛋白質(zhì)多因子檢測已經(jīng)是一種常用于生物學(xué)研究的生物化學(xué)技術(shù)，能夠同時對單個樣本中的多個微量表達(dá)功能性蛋白質(zhì)進(jìn)行定量或者定性，結(jié)合高通量上樣技術(shù)，可以實現(xiàn)一次實驗對多個樣本中的多個指標(biāo)進(jìn)行檢測。
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利用蛋白質(zhì)多因子檢測，我們單次實驗也可以獲得與質(zhì)譜一樣的組學(xué)級別的數(shù)據(jù)，通過各組比較，我們能獲得組間的差異因子有哪些，結(jié)合數(shù)據(jù)庫富集分析，我們可以獲得與實驗處理相關(guān)的分子功能，疾病、信號通路相關(guān)的上下游聯(lián)系。
高通量 大數(shù)據(jù) 大文章
蛋白多因子檢測的應(yīng)用
2024
在生物學(xué)研究，對樣本中多個功能性靶標(biāo)表達(dá)量同時分析，可以獲得實驗樣本整體的炎癥、趨化、免疫等分子機(jī)制、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能、磷酸化程度等，在整個研究項目的上游方案擬定或者下游結(jié)果驗證都使用。
在臨床醫(yī)學(xué)、中醫(yī)藥學(xué)、藥學(xué)、流行病學(xué)研究中，針對疾病診斷治療的科學(xué)研究中，與生物學(xué)研究類似，利用蛋白質(zhì)多因子檢測技術(shù)結(jié)合大隊列能快速判斷疾病的誘發(fā)機(jī)制、關(guān)鍵標(biāo)志物篩選、治療藥物篩選、治療方案優(yōu)化等。
在功能性食品、環(huán)境、生物材料等與人類健康改善、壽命延長相關(guān)的研究領(lǐng)域中蛋白質(zhì)多因子評估也有很重要的作用，檢測不同實驗組的微量功能性蛋白質(zhì)表達(dá)水平可以從蛋白組水平評估研發(fā)的產(chǎn)品的使用效果。
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蛋白多因子檢測技術(shù)的優(yōu)勢
2024
除了明顯的檢測指標(biāo)數(shù)量優(yōu)勢，與傳統(tǒng)的單靶標(biāo)檢測技術(shù)例如WB、ELISA相比，蛋白多因子檢測技術(shù)具有相當(dāng)多的優(yōu)勢！
（1）操作簡單，無需特殊處理，無需高溫煮沸，無需特殊儀器，以RayBio多因子檢測技術(shù)（抗體芯片）為例：
①樣本處理：血清樣本制備只需簡單稀釋，細(xì)胞、組織等樣本只需簡單破碎裂解無需煮沸，其余上清、洗液視具體情況而定是否需要透析濃縮。
②實驗步驟：將樣本孵育至預(yù)包被的蛋白質(zhì)捕獲抗體芯片上，到時間清洗、添加二抗、顯色底物，上機(jī)檢測熒光（是不是和ELISA一樣簡單）。
③常規(guī)做過WB的實驗室即可滿足實驗需求，無需購買額外試劑、耗材、儀器！
（2）樣本需求量少，單次上樣量低至10μL即可檢測20+個因子！
（3）樣本兼容性高，除了常規(guī)的血清、血漿、細(xì)胞裂解物等樣本，在科研中取得的灌洗液、組織沖洗液、尿液、乳汁等都能作為檢測樣本，并且已經(jīng)有很多成功案例。
（4）靈敏度高，利用與ELISA相同的抗原抗體結(jié)合原理，采用與生產(chǎn)ELISA試劑盒同樣的抗體進(jìn)行芯片包被，對樣本的檢測靈敏度可達(dá)pg級別。
（5）穩(wěn)定性性高， 以rayplex流式多因子檢測試劑盒為例，在精準(zhǔn)度評估中，一個試劑盒中檢測的所有因子的CV值都在7%以下。
技術(shù)原理
2024
目前，蛋白質(zhì)多因子檢測技術(shù)已經(jīng)有非常多的專利申請，但是靈敏度最高的技術(shù)還是需要依靠抗原抗體的特異性識別為基礎(chǔ)，下面介紹的幾種技術(shù)就是目前市面上開發(fā)高靈敏多因子檢測技術(shù)試劑盒常用的實驗方法：
雙抗夾心：將所有待檢測因子的捕獲抗體按照一定順序包被在修飾后的載玻片或NC膜上，與樣本中對應(yīng)靶標(biāo)結(jié)合后，再結(jié)合檢測抗體，激發(fā)HRP底物或者是CY3的熒光，通過熒光強(qiáng)度進(jìn)行多因子的定量。
CBA技術(shù)：結(jié)合雙抗夾心法的免疫分析技術(shù)將捕獲抗體包被在不同尺寸及熒光（如：APC）強(qiáng)度的流式微珠上檢測抗體攜帶另一種熒光（如：PE），對樣本進(jìn)行孵育后，使用標(biāo)準(zhǔn)流式細(xì)胞儀平臺對液體樣本中多種可溶性蛋白進(jìn)行一次性定量分析。
標(biāo)記法：直接對樣本中蛋白質(zhì)進(jìn)行生物素標(biāo)記，與預(yù)包被的一抗進(jìn)行結(jié)合后激發(fā)HRP底物或者是CY3的熒光進(jìn)行多因子半定量檢測。
蛋白多因子技術(shù)的檢測平臺
多因子檢測技術(shù)的普及，也依賴于其對檢測儀器的適配性，不像質(zhì)譜技術(shù)，目前市面上多種多因子檢測試劑盒所需要的儀器都是我們實驗室常備的，例如：
WB成像系統(tǒng)：膜芯片系列利用傳統(tǒng)WB曝光系統(tǒng)進(jìn)行檢測，曝光儀、膠片機(jī)均可檢測。
流式細(xì)胞儀：利用CBA技術(shù)的rayplex流式多因子利用含有PE及APC通道的流式細(xì)胞儀即可檢測。
玻璃芯片掃描儀：玻璃芯片系列檢測需要具有Cy3熒光劑（綠色）通道，能夠掃描標(biāo)準(zhǔn)大小的玻片（25*75*1mm），≤20μm的像素分辨率的掃描儀 （大多數(shù)基因芯片掃描儀都可進(jìn)行檢測）。
蛋白質(zhì)多因子檢測技術(shù)的應(yīng)用前景
2024
科研技術(shù)不斷突破，探索的邊界也在不斷擴(kuò)大。在這個充滿未知的世界里，我們需要能幫我們快速鎖定目標(biāo)，還能讓我們的研究更加精準(zhǔn)的科學(xué)技術(shù)，來幫我突破層層科研難題。
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